首页 冠亚体育(山东)有限公司 产品FAQ

细胞培养常见问题解答

Q:培养基 pH 值异常

A:

• 二氧化碳分压设置错误:根据培养基中碳酸氢钠的浓度而增加或降低培养箱中二氧化碳分压。

• 培养箱无二氧化碳:定期观察二氧化碳压力表,及时更换二氧化碳钢瓶。

• 细胞培养瓶盖拧得过紧:将盖子旋松 1/4 圈,或换成透气盖培养瓶。

• 细菌、真菌污染 丢弃细胞和培养基。

• 培养基中的平衡盐不匹配:二氧化碳平衡环境中使用以 Earle's 平衡盐为基础的培养基,大气条件下使用以Hank's 平衡盐为基础的培养基。

• 碳酸氢盐缓冲系统缓冲能力不足:加入 HEPES 缓冲液,使其终浓度为 10-25 mM。


Q:细胞生长缓慢

A:

• 培养基或血清改变:比较不同培养基中葡萄糖、氨基酸等成分有无差异;增加细胞接种密度;更换新鲜培养基。

• 必需生长促进成分 ( 如 L- 谷氨酰胺或生长因子 ) 缺乏、耗尽或降解使用新鲜培养基或向现有培养基中添加必需成分。

• 细胞初始接种密度过低:增大细胞接种密度。

• 支原体污染:检测培养物有无支原体污染,如果被污染,则弃之,或用支原体清除试剂进行清除。

• 细胞代次过高:取用新的细胞。

• 轻度细菌或真菌污染:在添加抗生素的培养基中培养细胞,如果培养物被污染,则弃之。

试剂储存不当血清应置于-5℃至 -20℃下储存 ;培养基应置于 2-8℃下避光储存;完全培养基应置于2-8℃下避光储存,并限在2周内使用。


Q:细胞死亡

A:

• 胰酶消化过度:缩短胰酶消化时间或降低消化用胰酶的工作浓度。

• 细胞状态差:取用新的细胞。

• 支原体污染:检测培养物有无支原体污染,如果被污染,则弃之,或用支原体清除试剂进行清除。

• 培养基中无附着因子:如采用无血清培养方法,应确保其含有附着因子,或使用包被过的培养器皿。

• 培养箱中无二氧化碳:定期观察二氧化碳压力表,及时更换二氧化碳钢瓶。

• 培养箱温度有波动:监测培养箱内温度。

• 转染试剂毒性过强,细胞代次过高,质粒纯度差使用低毒性的转染试剂或在转染后及时换液;使用低代次细胞转染 ;使用高品质的质粒转染。

• 细胞解冻或冻存过程中损伤大:取用新的细胞。

• 培养基的渗透压不正确:检查完全培养基的渗透压。大多数哺乳动物细胞可耐受的渗透压为 260-350 mOsmol/kg,昆虫细胞可耐受的渗透压为 340-380 mOsmol/kg。

• 培养基中有毒代谢产物蓄积过多:更换新鲜培养基。

登录

captcha

注册

*收货地址:
captcha

客服

微信