Q：产量低

A：

• 检查细胞生长情况，培养条件是否适合质粒增殖。尽可能选择高拷贝数的质粒。

• 如果质粒拷贝数低，可适当增加收集的菌液量，但是要保证菌体可以被完全裂解。

• 如果裂解液过于粘稠，应适当减少菌体量。

• 培养时间过长或在 2-8℃保存时间过长会明显降低产量，建议使用新鲜的菌液。

Q：质粒 DNA 中有基因组 DNA 污染

A：裂解时间不宜超过 5 分钟。

Q：影响下游酶切

A：洗涤液 WB 洗涤后应尽量离心去除残留的液体，待硅胶膜完全干燥后再加入洗脱缓冲液。