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人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,也称GM-CSF、CSF-2,是由多种活化的免疫细胞、间充质细胞和上皮细胞等分泌的一种单体糖蛋白。成熟的人GM-CSF与小鼠和大鼠GM-CSF的氨基酸序列同源性分别为54%和63%。GM-CSF具有多种生物学功能,如能刺激CD34+干细胞前体分化为单核细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞;可以做为中性粒细胞和树突状细胞的一种趋化因子。GM-CSF还参与Th1、Th17 细胞介导的自身免疫反应,与树突状细胞、小胶质细胞、肺泡巨噬细胞和嗜酸性粒细胞等的炎症激活有关。此外,GM-CSF通过免疫依赖和非依赖的途径调控肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆和细胞培养上清中的GM-CSF含量。本试剂盒采用高亲和力的抗人GM-CSF抗体预包被酶标板,将标准品/待测样本和生物素标记的抗人GM-CSF检测抗体同步加入微板孔中,经过孵育后样本中存在的GM-CSF会与酶标板上的预包被抗体及检测抗体特异性结合。洗涤去除未结合物后,将辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)加至微孔板中并孵育,通过检测抗体上的生物素和链霉亲和素发生的高强度非共价结合,形成“包被抗体-人GM-CSF蛋白-检测抗体-Streptavidin-HRP”免疫复合物。再次洗涤后,将显色底物TMB加至微板孔中,HRP会催化TMB底物生成蓝色产物,颜色反应的深浅将与样本中GM-CSF的浓度成正相关。而后加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考波长570 - 630 nm)处测定吸光度值。通过绘制标准曲线,由样本吸光度值可计算出样本中所含GM-CSF浓度。本试剂盒特异性强、检测灵敏度高,同时操作更加便捷。