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Universal Nuclease(全能核酸酶)是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),经基因工程改造并在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达纯化的非特异性广谱核酸内切酶,又称为非限制性核酸内切酶或广谱核酸酶。该酶能够不加选择的在链内任意核苷酸之间进行切割,将核酸降解成2~5个碱基的5’单磷酸寡核苷酸,因此全能核酸酶可高效降解各种形式(双链、单链、环状或线性)的DNA 和RNA 而不会导致蛋白的水解,被广泛用于去除生物制品中的核酸残留和污染。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法定量测定生物制品中Universal Nuclease的残留量。本试剂盒采用高亲和力的Universal Nuclease抗体预包被酶标板,将标准品/待测样本和生物素标记的抗Universal Nuclease检测抗体同步加入微板孔中,经过孵育后样本中存在的Universal Nuclease会与酶标板上的预包被抗体及检测抗体特异性结合。洗涤去除未结合物后,将辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)加至微孔板中并孵育,通过检测抗体上的生物素和链霉亲和素发生的高强度非共价结合,形成“包被抗体- Universal Nuclease蛋白-检测抗体-Streptavidin-HRP”免疫复合物。再次洗涤后,将显色底物TMB加至微板孔中,HRP会催化TMB底物生成蓝色产物,颜色反应的深浅将与样本中Universal Nuclease的浓度成正相关。而后加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考波长570 - 630 nm)处测定吸光度值。通过绘制标准曲线,由样本吸光度值可计算出样本中所含Universal Nuclease浓度。本试剂盒特异性强、检测灵敏度高,同时操作更加便捷。