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白细胞介素-6(Interleukin- 6,IL-6)是一种具有α螺旋结构、分子量为22-28 kDa、易于磷酸化和糖基化的多功能细胞因子。IL-6在急性期反应,免疫应答,造血,骨质代谢,和肿瘤发展等多种生物学过程中发挥重要作用。IL-6是与炎症相关最为典型的细胞因子,在感染或组织损伤过程中,由淋巴样细胞(T细胞,B细胞等)和某些非淋巴样细胞(巨噬细胞,单核细胞,肥大细胞等)分泌产生,作为宿主防御的一部分,以清除感染细胞或受损组织。但过度产生IL-6可导致慢性炎症性疾病的发展以及细胞因子风暴。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆和细胞培养上清中的IL-6含量。
本试剂盒采用高亲和力的抗人IL-6抗体预包被酶标板,将标准品/待测样本和生物素标记的抗人IL-6检测抗体同步加入微板孔中,经过孵育后样本中存在的IL-6会与酶标板上的预包被抗体及检测抗体特异性结合。洗涤去除未结合物后,将辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)加至微孔板中并孵育,通过检测抗体上的生物素和链霉亲和素发生的高强度非共价结合,形成“包被抗体-人IL-6蛋白-检测抗体Streptavidin-HRP”免疫复合物。再次洗涤后,将显色底物TMB加至微板孔中,HRP会催化TMB底物生成蓝色产物,颜色反应的深浅将与样本中IL-6的浓度成正相关。而后加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考波长570 - 630 nm)处测定吸光度值。通过绘制标准曲线,由样本吸光度值可计算出样本中所含IL-6浓度。本试剂盒特异性强、检测灵敏度高,同时操作更加便捷。