Calcein-AM是一种低细胞毒性的活细胞荧光染料，其本身不发荧光，在疏水基团乙酰甲氧基甲酯 (AM) 的作用下，可轻易穿透活细胞膜，被活细胞内的酯酶剪切形成极性分子Calcein，堆积在细胞内发出绿色荧光 (Ex=490 nm，Em=515 nm)。Calcein-AM只对活细胞进行标记且不会对细胞活性造成影响。

碘化丙啶 (PI) 是一种核酸染料，只能透过死细胞膜从而将细胞核染色，在特定激发光下呈红色荧光 (Ex=535 nm，Em=617 nm)。将Calcein-AM和PI匹配使用，就可以将活细胞和死细胞区分开来。